1、此染色液即為工作液，使用時直接將聚丙烯酰胺凝膠放在培養皿中以考馬斯亮藍染色液覆蓋凝膠，并緩慢搖動2h；
2、傾去染色液，用脫色液沖洗凝膠；
3、以脫色液覆蓋凝膠，緩慢搖動2h，傾去脫色液，再加入新脫色液進行脫色，直至獲得清晰的藍色的條帶和干凈的背景(通常此過程需要2～4h，也可脫色過夜至清晰的藍色的條帶和干凈的背景)；
4、對凝膠進行分析和照相，凝膠可放置在7%的乙酸中保存。也可用凝膠干膠裝置(P2000)對凝膠進行處理后保存。安全性：含有甲醇，無特殊毒性，按一般化學品操作規程處理。
明膠酶譜法試劑盒的使用注意事項：
1、制備聚丙烯酰胺時應注意排除氣泡。
2、明膠酶譜的活性受鈣離子，鋅離子，和PH值等因素的影響，因此緩沖液配制應嚴格準確，盡量用超純水，孵育溫度也掌握好。
3、用大梳子。
4、孵育液的PH在7.5-7.6，復性的TRITON時間長了會有絮狀物，所以實驗時盡量使用新鮮配置的。
5、孵育的37度不要在CO2培養箱中，因為會改變孵育液的PH值，在普通孵箱即可。
6、細胞樣本用PBS5倍體積震蕩裂解，估算細胞的體積，然后加入5倍體積的PBS，渦旋振蕩15-30s，而后靜置或低速離心或者手動震蕩。
更新時間：2022-10-24 
瀏覽次數：722
您的位置：